體視熒光顯微鏡是顯微鏡的一種，這種顯微鏡以紫外線為光源，通過觀察被測物的熒光圖像對物體作出判斷。目前，熒光體視顯微鏡是活體動物體內(nèi)熒光成像技術(shù)的核心技術(shù)，被用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。體視熒光顯微鏡是生物、工業(yè)檢測等領(lǐng)域進(jìn)行定性和定量研究的可靠工具之一，其常見操作方法和注意事項(xiàng)具體如下。

　　一、體視熒光顯微鏡的使用方法

　　1.將材料片放在載物臺上，開啟熒光顯微鏡穩(wěn)壓器.然后按下啟動組點(diǎn)燃紫外燈，需要注意的是，點(diǎn)燃紫外燈后十五分鐘內(nèi)不能關(guān)閉，關(guān)閉紫外燈后三分鐘內(nèi)不得再啟動。

　　2. 將激發(fā)濾光片轉(zhuǎn)至v，分色片調(diào)到v，選用495或475nm阻擋濾光片;選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。

　　3. 在玻片上加無熒光油，依次用“40x”“100 x”調(diào)焦鏡檢，呈現(xiàn)熒光。

　　4. 因熒光物質(zhì)受紫外光照射時(shí)隨時(shí)間的增長熒光逐漸變?nèi)酰虼绥R檢時(shí)應(yīng)經(jīng)常變換視野。

　　二、注意事項(xiàng)

　　(1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。

　　(2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點(diǎn)燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后，眼睛**適應(yīng)暗室，再開始觀察標(biāo)本。

　　(3)防止紫外線對眼睛的損害，在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。

　　(4)檢查時(shí)間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱;所以，多不得超過2～3h。

　　(5)熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié)　省時(shí)間，保護(hù)光源。天熱時(shí)，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí)，須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。

　　(6)標(biāo)本染色后立即觀察，因時(shí)間久了熒光會逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時(shí)間，防止封裱劑蒸發(fā)。

　　(7)熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn)： “-”—無或可見微弱熒光。“+”—僅能見明確可見的熒光。“++”—可見有明亮