【***** 使用手冊】色譜法，又稱“色層法”、“層析法”，早誕生于俄國植物學家——茨維特之手，后在此基礎上又相繼發展出薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法以及紙色譜法。目前，常見的液相色譜儀生產廠家有沃特世、安捷倫、島津、依利特、上海分析儀器廠、北京分析儀器廠等。　　在液相色譜儀開機前，我們首先應當做好準備工作，主要有配置試驗要求的流動相、安裝試驗用的色譜、將流動相過濾脫氣三點。流動相的過濾，主要是為了除去流動相中的微粒物質，所應用到的濾膜可分脂溶性濾膜(有機濾膜)、水溶性濾膜與通用型濾膜。　　而流動相的脫氣，則是為了流動相防止在泵、流路、檢測器等儀器組成部分中產生氣泡，從而造成泵的不穩定，并增加檢測器的噪音。據了解，氦氣脫氣、真空脫氣、超聲脫氣、加熱脫氣均可運用于液相色譜儀的流動相脫氣。脫氣的操作，需要以流動相中的混合物濃度不發生變化為主要原則。　　另外，色譜柱的安裝調試，還涉及反相色譜柱與正相色譜柱兩種。反向色譜柱多以硅膠為基質，常以硅膠健合C18、C8為填料。值得一提的是，液相色譜儀還應當采用穩定性較高的反相色譜柱。因為，這種色譜柱還能夠承受酸與堿的作用。同時，因存在著色譜儀遭受腐蝕的可能性，操作人員還應當勤勞更換每次試驗用水，不使用鹵化物。后，為控制樣品在分析過程中的解離，操作人員還需注意反向色譜柱使用時的pH值，過高的pH值會溶解硅膠，過低的pH則會造成烷基的脫落。　　除上述幾個檢測的開機準備工作以外，儀器設備本身的質量、色譜條件、操作人員技術熟練程度、儀器安裝環境，都是影響著液相色譜儀發揮作用的關鍵因素。不僅如此，儀器使用者還應當每三個月，就對液相色譜儀的清洗溶劑過濾器及溶劑瓶進行清洗，以此來保證儀器長時間、率的使用。 如何排除液相色譜儀高壓泵中的氣泡

　　在進行液相色譜儀分析實驗時，流動相再進入儀器之前，必須使用超聲波清洗機進行簡單的除氣泡處理，以防對泵造成損害，對檢測結果造成干擾。若在檢測過程中發現液相色譜儀恒流泵里有氣泡，須及時進行排除，排除高壓液相色譜儀泵中氣泡的方法如下。

　　1、首先，檢查流動相儲液瓶中的溶劑過濾頭是否阻塞。具體做法：將輸入三通器上的溶劑塑料連接管的卸下，將流動相儲液瓶置于高位，利用壓差使溶液流出。如果溶劑流的很順暢，說明溶劑過濾頭是好的。如果是一滴一滴的流出，則說明過濾頭阻塞，需要超聲清洗，復原。

　　2、用堵頭將儀器的高壓液流輸出口封住將色譜柱連在管路上、，可避免在抽液時將空氣抽入管路內。將儀器所配的注射器及塑料連接管插到放空閥的導管上，逆時針旋開放空閥旋鈕，抽液5-10mL，將泵的流速設定在每分鐘一毫升的流速。啟動泵，觀察塑料連接管的流動溶液是否還有氣泡。如沒有氣泡說明從過濾頭到放空閥這一段已將氣泡排除。

　　3、將泵關閉，將堵頭從儀器的高壓液流輸出口去掉將色譜柱從管路上卸掉、使輸出口放空。順時針關閉放空閥旋鈕，將泵的流速設定在3-5mL的流速，將泵內的阻尼器和壓力傳感器的氣泡趕出，流出溶液10-15mL將泵關閉。連接上色譜柱，將流速設定在每分鐘一毫升，啟動泵，觀察壓力及壓力脈動。

　　4、用水和異丙醇甲醇、交替沖洗泵的內腔，使吸附在內墻壁上的氣泡趕出。

　　5、應用快速降壓法趕出氣泡：用小堵頭將泵的流動相輸出口堵上，將流速設定在1毫升/分，將柱前壓力升至20Mpa左右，將排空閥快速打開，重復2~3即可。