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液相色譜儀色譜柱壓升高原因 液相色譜使用方法

時間:2023-01-12 09:30:02 作者:河北航信儀器 點擊:

液相色譜儀色譜柱壓升高原因 液相色譜使用方法(圖1)

  色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對于液相色譜儀來說,保持色譜柱的柱效、容量及滲透性,對于檢測結果的準確性有著比較重要的意義。而色譜柱的柱效受到內外多種因素影響,色譜柱壓升高就是其中之一。柱壓升高的原因可能是因為柱床內存在雜質,導致流動項阻力增加。  這次就來講一下,色譜柱壓升高的原因。  1.樣品的沉淀  當溶解樣品的溶劑與流動相不一致時,樣品進入色譜柱,有時可能因溶解度降低而沉淀出來,使色柱中產生樣品沉淀,造成流體阻力增加,引起柱壓升高。  2. 晶體的析出  使用含有緩沖液的流動相時,緩沖液中的無機鹽可能會殘留在部件內。它們會因在新流動相中的溶解度降低而析出,造成流體阻力加大、壓力升高。  3. 流動相的前處理  流動相過濾不**或為進行過濾,將雜質等固體物滯留到濾板上,引起雜質堵塞色譜柱濾片,引起柱壓升高。  4. 溶質吸附  當溶質在柱子上有較強的吸附,且所用的流動相難以將它們洗脫時,累積的未洗脫溶質也會造成阻力增大和壓力升高。  5. 流動相更換過度較快  當改變流動相體系時,不**的更換使不同性質、互不混溶的流動相存在于同一個體系之中,也會造成壓力升高。  6. **或霉菌孳生  未能做到磷酸鹽緩沖液現配現用,導致霉菌在流動相中、管路中或柱子進口處繁殖、生長堵塞濾板,導致壓力升高。  7. 壓力脈沖  運行過程中,有時會產生系統內壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會造成多孔填料的崩壞和柱床結構的微小變化,填料微屑的長期積累也可能會使柱床阻力增大,造成壓力升高。  液相色譜儀是一種精密的色譜儀器,它在協助使用者進行分析研究的同時,也需要使用者的細心呵護。對于每一種儀器,使用者都應該警惕使用時的不當操作,這樣不但可以獲得更加的檢測數據,還可以有效保護儀器,延長儀器壽命。 液相色譜儀與氣相色譜儀的3點區別

  1、分析對象的區別  GC:適于能氣化、熱穩定性好、且沸點較低的樣品;但對高沸點、揮發性差、熱穩定性差、離子型及高聚物的樣品,尤其對大多數生化樣品不可檢測占有機物的20%  HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括有機介質溶液),不受樣品揮發性和熱穩定性的限制,對分子量大、難氣化、熱穩定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測用途廣泛,占有機物的80%  2、流動相差別的區別  GC:流動相為惰性,氣體組分與流動相無親合作用力,只與固定相有相互作用。  HPLC:流動相為液體,流動相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對分離起正向作用。且流動相種類較多,選擇余地廣,改變流動相極性和pH值也對分離起到調控作用,當選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動相也可以增大分離選擇性。  3、操作條件區別  GC:加溫操作  HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬小)


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