【***** 使用手冊】中醫(yī)藥是中華民族的一個偉大瑰寶，在當(dāng)今科技正在迅速發(fā)展的時代，采用高科技手段對中醫(yī)藥進(jìn)行發(fā)掘研究繼承創(chuàng)新，是當(dāng)務(wù)之急。液相色譜法自60年代至今，因其具有快速、、靈敏等優(yōu)點而在中藥化學(xué)成分分析方面得到了迅速的發(fā)展和應(yīng)用。　　液相色譜法是采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動相泵裝入有填充劑的色譜柱對樣品進(jìn)行分離測定的色譜方法。近年來對液相色譜監(jiān)測中藥的研究非常多，液相色譜法也是集經(jīng)典液相色譜和氣相色譜的優(yōu)勢于一身。　　在中藥材檢測方面，液相色譜儀以其對復(fù)雜樣品成分的高分析能力，能夠?qū)θ藚⒅性碥铡ⅫS芪中黃芪甲苷、訶黎中鞣花酸、青蒿中青蒿素、田七中田七氨酸等上百種中藥材中的多種活性成分進(jìn)行檢測。除了對中藥材的活性成分進(jìn)行檢測，液相色譜儀還可以對中藥材在種植、運輸中產(chǎn)生的有害成分進(jìn)行檢測，對中藥種植中的農(nóng)藥殘留，運輸保存不當(dāng)而產(chǎn)生的黃曲霉毒素都可以檢測。　　實踐經(jīng)驗證明，液相色譜的適用范圍較廣，可用于分析高沸點、熱不穩(wěn)定性、大分子量的樣品，是一種非常有效和普遍適用的中藥有效成分的分析方法。而隨著色譜技術(shù)的發(fā)展，結(jié)合計算機(jī)各種軟件的開發(fā)，液相色譜與各種檢測儀器聯(lián)用，更加拓寬了液相色譜的應(yīng)用范圍。　　液相色譜法應(yīng)用在中醫(yī)藥質(zhì)量檢測中后，結(jié)束了中藥材幾千年來依靠人工觀、摸、聞、嘗來鑒定中藥材質(zhì)量的歷史，讓中藥材的檢測更具和科學(xué)。為不了解中醫(yī)藥的人們揭示了中藥材的成分、效力、試驗方法，推動了中醫(yī)藥的現(xiàn)代化發(fā)展，讓中醫(yī)藥的藥理有了科學(xué)的解釋。 液相色譜儀常見六個故障問題 　　液相色譜儀峰分叉怎么回事？

　　造成這種情況的原因一般是色譜柱被污染，或柱頭填料塌陷導(dǎo)致的。

　　對于**種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，***后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。

　　對于第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。

　　如何排除液相色譜儀氣泡溢出故障？

　　流動相內(nèi)產(chǎn)生都無法**不斷產(chǎn)生的氣泡，主要是因為過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動相。

　　過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸破壞，流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調(diào)至1.0～3.0ml/min，純水沖洗過濾器1小時左右。即可將過濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時即可。

　　自檢時有時會出現(xiàn)“鎢燈能量低”的錯誤？

　　一般來說，原因是系統(tǒng)中有擋光物，光路偏離，鎢燈電源系統(tǒng)或鎢燈燈泡已壞。這時首先要檢查光度室是否有擋光物；打開檢測器光源室蓋，檢查氘燈是否點亮；如果氘燈不亮，則關(guān)機(jī)，更換新氘燈，換時，需注意型號；檢查氘燈保險絲，看是否松動、氧化、燒斷；如果故障，應(yīng)立即更換；再開機(jī)重新自檢；若仍出現(xiàn)上述故障，則重新安裝軟件后再進(jìn)行自檢。

　　出現(xiàn)壓力波動大，流量不穩(wěn)定？

　　造成這種情況的原因是系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。

　　液相色譜儀峰面積重復(fù)性不好？

　　主要原因可能有進(jìn)樣閥漏液、加樣針不到位或液量不足。針對**種情況，處理時應(yīng)對更換進(jìn)樣閥墊圈；對于第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中，儲液器內(nèi)的溶液如長時間未用應(yīng)清洗儲液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機(jī)鹽析出或沉積；樣品的前處理也很重要，**樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，**溶解，盡量減少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時避免注射過濃的樣品溶液，以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞；色譜柱作好標(biāo)記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。

　　液相色譜柱壓升高？

　　造成柱壓升高的原因很多。一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了異常的占位性物體，造成流體阻力加大所引起的。例如，緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi)，或樣品污染沉積。針對**種情況，處理時應(yīng)先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應(yīng)提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，***后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。