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簡述薄層色譜法的使用方法 薄層色譜使用方法

時間:2023-01-07 09:32:02 作者:河北航信儀器 點擊:

  【*** 使用手冊】薄層色譜法是指根據各成分對同一吸附劑的吸附能力不同,在流動相流動固定相的過程中,連續發生吸附、解吸、再吸附、再解吸,實現各成分的相互分離的吸附薄層色譜法分離法。 以下,根據網上的資料,整理在薄層色譜法的使用中可以做的步驟  1.制定薄層板,將固定相和水用研缽向一個方向研磨混合,除去表面氣泡后,放入涂布器,將涂布器順暢地移動到玻璃板上進行涂布,取下涂布在薄層上的玻璃板,放置在水平臺上在室溫下干燥后,在規定的溫度下干燥,放入干燥劑進行干燥 使用前檢查均勻度。  2.點樣除另有規定外,點基線距底邊規定距離,點直徑和點間距與紙色譜法相同,點間距看點擴散情況,不影響檢測 做樣品的時候,注意不要損傷薄層表面。  3.展開油缸時,事先用展開劑使之飽和。 在汽缸中加入足夠量的展開劑,將與汽缸相同高度、寬度的濾紙貼在墻壁上,一端浸在展開劑中,密封汽缸頂部的蓋子,使系統平衡,或按照本文的規定操作。將樣品薄片放入展開缸的展開劑中,浸漬在展開劑中的深度從薄片的底邊開始 (請勿將樣品點浸入展開劑),密封蓋板,展開至規定距離取出薄板晾干,按照各品種以下的規定進行檢查。  4.用薄層掃描儀掃描檢測色譜斑點,或直接掃描色譜斑點到薄層上定量上可以利用薄層掃描法。薄層掃描的方法除另有規定外,還依據各種薄層掃描儀的結構特征和使用說明根據具體情況,選擇吸收法或熒光法,以二波長或一波長進行掃描。 對薄層掃描的結果產生影響原因很多,在保證供試品的斑點在**濃度范圍內形成線形的基礎上,與供試品對照品在同一薄層展開掃描,比較定量,減少誤差。 有各種各樣的供試品只有得到分離度和再現性好的薄層色譜,才能得到滿意的結果。  由于資料有限,因而上述內容并不**,歡迎補充。 薄層色譜儀的適用

薄層色譜又叫薄板層析,是色譜法中的一種,是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜;

它兼備了柱色譜和紙色譜的優點,一方面適用于少量樣品(幾到幾微克,甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時,把吸附層加厚加大;

因此,又可用來精制樣品,此法特別適用于揮發性較小或較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的質。

簡述薄層色譜法的使用方法 薄層色譜使用方法(圖1)

此外,薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應及進行柱色譜之前的一種“預試”。

薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑,帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上;

涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內,浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時;

將色譜板取出,干燥后噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。

薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又稱薄層層析,屬于固-液吸附色譜。

是近年來發展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法,它兼備了柱色譜和紙色譜的優點。

一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克,甚至0.01μg)的分離;

另一方面若在制作薄層板時,把吸附層加厚,將樣品點成一條線,則可分離多達500mg的樣品。

因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發性較小或在較高溫度易發生變化而不能用氣相色譜分析的物資。

此外,在進行化學反應時,常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應是否完成。


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